Pada fase terang fotosinetsis
(reaksi fotofosforilasi) menghasilkan NADPH2
pada fotosistem I (reaksi Non Siklik) dan ATP pada fotosistem II (reaksi
fereoksida ke sitokrom b6 dan dari sitokrom b1 ke
fase terang fotosintesis digunakan untuk mereduksi CO2. Pada fase ini
tidak dibutuhkan cahaya tetapi reaksi yang etrjadi
adalah reaksi kimia murni sehingga disebut Fase Gelap Fotosintesis.
Tanaman dalam mereduksi CO2 dari udara pada
dasarnya dibedakan atas 3 kelompok yaitu :
1. Kelompok tanaman yang mengikuti Daur Calvin (siklus Calvin; tanaman C3)
2. Kelompok tanaman yang mengikuti Daun Hatch-Slack (tanaman C4)
3. Kelompok tanaman yang mengikuti daur Metabolisme Asam Crassulaceae (CAM).
Daur Calvin (C3) Antara tahun
1946-1953, Malvin Calvin bersama-sama peneliti lain dari Universitas
California mengidentifikasi produk awal dari reduksi CO2. Calvin dan
kawan-kawan menggunakan teknik kromatografi
dan karbondioksida bermuatan radioaktif 17 (14CO2) mendapatkan produk awal
reduksi CO2 (fiksasi CO2) pada ganggan
Chlorella sp adalah asam-3-fosfogliserat yang sering disingkat dengan PGA. Oleh
karena senyawa yang pertama dihasilkan
adalah senyawa berkarbon tiga (PGA=APG), maka
daur reaksinya disebut daur C3 dan tumbuhan yang mengikuti daur ini
disebut tumbuhan C3 (Tanaman C3).
Daur Calvin sering disebut juga
reaksi gelap fotosintesis atau fiksasi CO2
atau fase Blackman. Daur ini terdiri atas sekumpulan reaksi kimia yang
berlangsung di dalam stroma kloroplas dan tidak
membutuhkan energi dari cahaya matahari secara langsung. Sumber energi
yang diperlukan berasal dari fase terang
fotosintesis. Reaksi gelap pada dasarnya berlangsung pada waktu yang sama
dengan reaksi terang.
Secara umum Daur Calvin terdiri atas sejumlah reaksi, dan secara sederhana
dikelompokkan menjadi empat fase, yaitu
1. Karboksilasi ribulosa bifosfat (RuBP) menjadi fosfogliserat (PGA) atau tahap
fiksasi. Proses ini dikatalisis oleh
enzim RuBP karboksilase /oksigenase (Rubisco). Pada peristiwa ini
oksigen dari CO2 tidak dibebaskan dalam
bentuk O2, melainkan bergabung membentuk satu
molekul PGA
RuBP (5 carbon) + CO2 2 PGA (3 carbon) RUBISCO
2. Reduksi PGA membentuk triosa fosfat,
3. Regenerasi RuBP. Triosa fosfat digabungkan dikombinasikan melalui
serangkaian reaksi yang kompleks membentuk
Ru5P (ribulosa 5-P)i. Tahap akhir
regenerasi RuBP adalah
Ru5P + ATP RuBP + ADP + Pi
Karboksilasi, reduksi dan regenerasi secara kolektif dinamakan Siklus Calvin-Benson.
4. Sintesis produksi akhir (sintesis sukrosa dan pati).
Daur Calvin-Benson memerlukan
tiga kali putaran sempurna untuk
mendapatkan satu molekul karbohidrat yang paling sempurna, namun untuk
mempersingkat, maka dituliskan tiga molekul RuBP
(P-C5H8O5-P) dengan tiga moleku CO2 sebagai titik awal.
Senyawa C6H5O4-P dinamakan senyawa asam fosfogliserat atau APG
(phospoglyceric acid atau PGA). Jadi tahap awal daur Calvin
menunjukkan bahwa 3 RuBP bereaksi dengan tiga CO2 dan tiga molekul
H2O membentuk enam senyawa PGA.
PGA yang terbentuk oleh ATP dan
NADPH2 dengan bantuan enzim
triosa fosfat dehidrogenase diubah menjadi asam-3-fosfogliserat (PGAL).
Sebahagian dari PGAL yang terbentuk oleh
enzim triosa fosfat isomerase diubah menjadi dihidroksi aseton fosfat (DHAP).
Pada proses ini PGA bergabung dengan
hidrogen yang dihasilkan selama fase terang yang tersedia dalam bentuk
NADPH2. Reaksi pemindahan hydrogen
ke PGA membutuhkan energi dalam bentuk ATP yang
juga didapatkan selama fase terang.
Dari proses tersebut dihasilkan 6C3H7O4-P. Senyawa ini selanjutnya akan berubah lagi
dengan cara melepaskan satu molekul air dan
membentuk senyawa 6C3H5O3-P yang lazim
disebut fosfogliseraldehida atau PGAL.
Dari enam molekul PGAL yang baru dibentuk hanya satu molekul PGAL yang merupakan hasil
bersih fotosintesis secara keseluruhan,
sedangkan lima molekul PGAL lainnya mengalami serangkaian reaksi kimia yang
rumit dan hasil akhirnya adalah 3 molekul RuBP. Secara sederhana
dapat dijelaskan sebagai
berikut : DHAP dan PGAL secara bersama-sama mengalami kondensasi dengan bantuan enzim
aldolase akan menghasilkan fruktosa 1,6 fosfat
yang selanjutnya oleh enzim fosfatase melepaskan 1 fosfat organiknya
(Pi) sehingga terbentuk fruktosa- 6-fosfat.
Fruktosa-6-fosfat dengan PGAL, oleh enzim
transketolase diubah menjadi eritrosa-4-fosfat dan xilulosa-5-fosfat.
Eritrosa-4-fosfat dengan dihidroksi aseton fosfat, oleh enzim aldolase membentuk
sedoheptulosa-7-fosfat yang selanjutnya dengan
PGAL oleh enzim transketolase diubah menjadi ribosa-5-fosfat dan
xilulosa-5-fosfat dengan bantuan
enzim epimerase diubah menjadi ribosa-5-fosfat. Ribosa-5-fosfat oleh enzim
epimerase dan ATP diubah menjadi ribulosa 1,5 bifosfat (RuBP) dan ADP. RuBP
yang terbentuk selanjutnya siap untuk memfiksasi
CO2 dari udara.
PGAL yang merupakan hasil bersih fotosintesis akan mengalami salah satu dari tiga
peristiwa yaitu (i) dapat langsung digunakan dalam proses pernapasan
atau sebagai bahan untuk membangun komponen
structural sel tumbuhan, (ii) untuk pemeliharaan sel. PGAL yang
berlebih akan dingkut melalui floem ke sel-sel
akar, batang atau kebagian lain tanaman yang tidak berfotosintesis setelah
terlebih dahulu diubah menjadi
glukosa atau fruktosa, (iii) disimpan pada bagian lain tanaman dalam bentuk pati.
Daur Hatch dan Slack (C4) Pada tahun 1966 M.D. Hatch dan
C.R. Slack membuktikan secara
detail jalur fiksasi CO2 pada tanaman spesies graminae. Pada tanaman-tanaman
seperti jagung,
tebu, sorgum, dan beberapa rumput tropika, CO2 menghasilkan asam oksaloasetat, malat, dan
aspartat pada tahap awal reaksinya. Kelompok
tanaman ini disebut tanaman C4 karena produk awal dari fiksasi CO2
adalah asam-asam yang berkarbon empat
(4). Pada tahap awal reaksi golongan
tanaman C4, CO2 ditangkap oleh
fosfoenolpiruvat (PEP) dengan bantuan enzim fosfoenolpiruvat karbioksilase
menghasilkan asam-asam oksaloasetat dan
piruvat. CO2 yang masuk ke dalam mesofil daun terlebih dahulu bereaksi
dengan H2O membentuk asam karbonat (HCO3)
dengan bantuan enzim karbonik anhidrase. Selanjutnya direaksikan dengan
PEP menghasilkan asam oksaloasetat
(1). Tahap selanjutnya asam
oksaloasetat yang terbentuk mengalami reduksi
oleh NADPH dengan enzim malat dehidrogenase
menghasilkan asam malat
(2). Pada beberapa tanaman C4 asam oksaloasetat
dalam mesofil daun akan bereaksi dengan
asam amino (umumnya alanin) dan menghasilkan asam
apartat dan asam piruvat
(3). Berbeda dengan tanaman C3, tanaman C4
memiliki seludang berkas pembuluh di samping
sel mesofil. Pada sel mesofil terdapat enzim PEP karboksiale sedang
dalam sel seludang berkas pembuluh (bundle
sheath cell) mengandung enzim RuBP karboksilase (Rubisko). Asam malat dan aspartat melalui
palsmodesmata sel ditransformasi ke
seludang berkas pembuluh. Selanjutnya asam malat mengalami
dehidrogenase sehingga akan membentuk asam
piruvat dengan melepaskan CO2
(4). CO2 yang terlepas dari dehidrogenase
malat akan ditangkap oleh RuBP dengan bantuan
Rubisko akan mengalami daur Calvin seperti pada tanaman C3. Pada spesies tanaman yang banyak
membentuk asam aspartat, setelah
ditransaminasi menghasilkan asam oksaloasetat. Asam
oksaloasetat direduksi oleh NADPH menghasilkan malat. Di dalam
seludang berkas pembuluh, asam piruvat dapat
mengalami proses transaminasi menghasilkan alanin
yang selanjutnya kembali ditransformasi ke sel mesofil. Dalam sel mesofil
alanin kembali mengalami reaksi transaminasi
sehingga terbentuk asam aspartat. Asam aspartat dengan bantuan ATP dan
asam fosfat (H2PO4) serta enzim piruvat
fosfat kinase diubah menjadi PEP untuk
selanjutnya memfiksasi CO2 dari udara. Pada golongan tanaman C4 tiap molekul CO2 yang
difiksasi diperlukan 2 ATP selain tiga ATP
yang digunakan dalam daur Calvin. Dua ATP
ini diperlukan untuk Pada golongan
tanaman C4 tiap molekul CO2 yang difiksasi
diperlukan 2 ATP selain tiga ATP yang digunakan dalam daur Calvin. Dua ATP ini
diperlukan untuk mengubah asam piruvat
menjadi PEP dan AMP menjadi ADP. Dengan demikian maka ringkasan reaksinya
secara keseluruhan adalah:
6 CO2 + 30 ATP + 12 NADPH + 12 H + 24 H2O
Glukosa + 30 ADP + 30 Pi + 12 NADPH
Metabolisme Asam Crassulaceae (CAM) Sejumlah tanaman yang bersifat
sukulen dari famili
Crassulaceae mempunyai daun yang tebal dengan laju transpirasi yang rendah. Kelompok
tanaman ini umumnya tidak memiliki lapisan
sel palisade yang teratur, sel-sel daun ranting merupakan sel mesofil, empunyai
vakuola yang relatif besar. Pada malam hari,
umumnya stomata tanaman CAM membuka
dan pada siang hari stomata tertutup.Pada malam hari (waktu gelap) pati pada
mesofil daun
diuraikan melalui proses glikolisis (respirasi) hingga terbentuk PEP. CO2 yang masuk ke dalam daun
setelah bereaksi dengan air seperti tanaman
golongan C4 difiksasi oleh PEP dan diubah menjadi malat. Asam malat yang
terbentuk sebahagian besar ditransformasikan
ke dalam vakuola sel dan disimpan samapi
siang hari. Pada siang hari
asam malat berdifusi secara pasif ke luar dari vakuola dan mengalami
dekarboksilasi melalui salah satu dari tiga cara yang mungkin
terjadi. CO2 yang terlepas dari asam malat kemudian difiksasi oleh RuBP dan terus
mengalami daur seperti pada tanaman C3. Dengan
demikian maka pada dasarnya tanaman CAM melakukan fiksasi CO2
mengikuti Daur Calvin (C3) dan Daur Hatch dan
Slack (C4). Pada siang hari terjadi Daur Calvin dengan memanfaatkan CO2 dari
dehidrogenase malat, dan malam hari terjadi
Daur Hatch dan Slack (C4) dengan memanfaatkan CO2
yang berdifusi ke dalam sel mesofil pada malam hari.
Perubahan energi cahaya menjadi
energi kimia menghasilkan ATP
dan NADPH tereduksi. ATP dibentuk melalui proses fotofosforilasi, sedangkan
NADPH dibentuk melalui proses fotoreduksi.
Fase terang fotosintesis merupakan fase reaksi kimia fotosintesis yang membutuhkan
cahaya sehingga fase terang disebut juga fase
reaksi fotokimia.
Pada fase fotokimia terjadi reaksi fotolisa air dan penyerapan energi cahaya matahari
oleh klorofil di dalam kloroplas. Proses
ini dikatalisis oleh kompleks protein yang tertanam pada membran tilakoid.
Penyerapan energi cahaya atau fotosistem
terdiri dari dua sistem yang saling berhubungan.
Sistem pertama disebut Fotosistem I (PS I) yang menyangkut penyerapan energi cahaya matahari
pada panjang gelombang sekitar 700 nm.
Sistem kedua, menyangkut penyerapan energi matahari pada panjang gelombang
sekitar 680 nm disebut Fotosistem II (PS
II).
Fotosistem I sebagian besar tersusun dari klorofil a dan sedikit klorofil b dan b karoten.
Satu dari khlorofil a pada fotosistem I
menjadi spesial karena lingkungan kimianya dapat menyerap cahaya dengan panjang
gelombang + 700 nm sehingga disebut P
700. P 700 ini merupakan pusat reaksi dari PS I dan semua pigmen lainnya.
Pada PS I akan mengirim energi eksitasinya
ke P 700. Pada PS I juga dijumpai paling sedikit 2 molekul protein yang
mengandung Fe dan setiap 4 atom Fe pada
molekul protein ini mengikat 2 atom belerang sehingga disebut protein Fe-S.
Fe-S merupakan penerima elektron utama pada
PS I. PS II mengandung klorofil a dan b-karoten serta sedikit klorofil b. Penerima elektron
utama pada PS II ini adalah sebuah klorofil a
yang tidak berwarna dan tidak mengandung Mg yang disebut Feofitin (FeO).
PS II juga mengandung quinon (Q) yang
berasosiasi dengan FeO, P 680 dan protein yang terikat pada P 680. Di
samping itu PS II juga mengandung salah satu atau lebih protein
yang mengandung mangan dan 13 disebut protein Mn.
Setiap dua ion Mn pada protein PS II dijembatani antara lain satu ion
Cl
Fotosistem I dan PS II merupakan komponen penyalur
energi dalam rantai pengangkutan elektron fotosintesis secara
kontinyu dari molekul air sebagai donor elektron ke NADP.
Pengangkutan elektron dalam membran tilakoid selama fase terang fotosintesis dimulai dari
molekul air (H2O) ke fotosistem II. Elektron dari
fotosistem II dipindahkan ke fotsoistem I melalui serangkaian akseptor
elektron. Setiap perpindahan elektron melepaskan
energi sedikit demi sedikit. Enegi yang dibebaskan digunakan untuk
memfosforilasi ADP membentuk ATP.
Apabila foton diserap oleh
molekul pigmen pada kompleks PS II,
maka energi akan ditransfer ke P 680 dengan cara reduksi induktif. Hal ini
akan mengakibatkan P 680 tereksitasi dan
segera melepaskan elektronnya dan ditangkap oleh mol FeO. P 680 yang
kehilangan elektronnya dan menjadi bermuatan positif (P 680+)
sehingga akan menarik elektron dari protein Mn di sekitarnya. Apabila
protein Mn telah teroksidasi, akan menyerap
elektron dari molekul H2O sehingga molekul air akan terurai menjadi H+ dan OH
dan satu elektron. Satu elektron yang
dilepaskan akibat penguraian air diterima oleh klorofil (P680) yang telah
mengalami eksitasi sehingga klorofil tersebut kembali dalam keadaan
stabil. Sementara itu elektron yang dilepaskan
dari P680 digunakan untuk mereduksi NADP menjadi NADPH. Pengangkutan
elektron pada fotosistem II disebut lintasan
pengangkutan elektron Non Siklik (reaksi non siklik).
Elektron yang tereksitasi pada PS II dialirkan ke PS I melalui molekul penerima elektron
berturut-turut ke sit b3 yang berasosiasi dengan
FeO dan Quinon (Q) ke plastoquinon (PQ), Fe-S, sitokrom f Plastosianin
(PS) sampai pada mol P 700. Pengangkutan
elektron dari mol P 700 ke Fe-S dirangkaikan dengan
pembentukan ATP dari ADP dengan Pi. Penyerapan foton oleh PS I dengan
panjang gelombang > 680 nm mengakibatkan
elektron tereksitasi dari P 700 ke Feredoksin – sulfat (Fe-S). Selanjutnya
elektron dialirkan ke sit b6, dan diteruskan ke PS, Fe-S, Cyt f, PC
dan kembali ke P 700. Pengangkutan
elektron pada PS I ini disebut pengangkutan elektron siklik (reaksi siklik).
(Figures from Taiz and Zeiger (2002) Plant Physiology)
Energi foton yang bersumber dari
cahaya matahari diabsorbsi oleh
klorofil dan menyebabkan eksitasi elektron. Keadaan tereksitasi ini sangat
tidak stabil dan cenderung kembali ke keadaan
semula (ground state). Pada saat kembali ke ground state terdapat energi
yang dibebaskan. Energi tersebut dapat
digunakan untuk aktivitas metabolisme. Pada tumbuhan, kloroplas meneruskan
elektron tereksitasi ke molekul tetangganya yang
disebut akseptor elektron primer. Rangkaian pemindahan elektron menghasilkan
ATP, NADPH, dan oksigen. Mekanisme
pembentukan ATP mengikuti cara Chemioosmosis
coupling (osmosis kimia berpasangan), yang terjadi karena adanya proses yang
berpasangan antara aliran proton dan aliran
elektron. Aliran elektron di dalam kloroplas menghasilkan energi, energi
tersebut digunakan untuk mengaktifkan
angkutan ion H+ dari satu sisi membran ke sisi membran yang lain. Di dalam
kloroplas protein pembawa memindahkan ion H+ melewati
membran tilakoid dari stroma ke ruang tilakoid dan
menyebabkan terjadi perbedaan konsentrasi H+ pada membran. Konsentrasi H+ di ruang tilakoid lebih tinggi dari pada bagian luarnya.
Perbedaan ini menyebabkan pengaliran ion H+ dari ruang tilakoid kembali ke
luar. Aliran proton ini
menghasilkan energi untuk mengaktifkan enzim ATPase. Melalui fosforilasi dengan
bantuan enzim ATP-ase, ADP diubah menjadi ATP
(Permana dkk, 2004)
Cahaya Matahari sebagai Sumber
Energi Fotosintesis
Gelombang cahaya merupakan sebagian kecil dari spektrum radiasi elektromegnetik.
Setiap radiasi dalam spektrum ini
mempunyai panjang gelombang dan kandungan energi yang khas. Makin besar
panjang gelombang, makin kecil energi yang
dikandungnya. Cahaya matahari merupakan sumber energi utama bagi semua
organisme hidup. Cahaya putih yang tampak
pada cahaya matahari terdiri atas gelombang dengan panjang yang
berbeda-beda dan tersusun berurutan. Melalui
prisma kaca, cahaya putih diuraikan menjadi deretan warna-warna. Pita
warna-warna ini dinamakan spektrum tampak.
Radiasi matahari yang digunakan untuk berlangsungnya proses
fotosintesis berasal dari radiasi cahaya tampak (visible light). Energi
radiasi cahaya dapat dijelaskan dengan teori
kuantum dan elektromagnetik. Dalam teori kuantum dikatakan bahwa cahaya
merambat dalam bentuk aliran partikel
yang disebut foton. Energi yang terkandung dalam foton disebut kuantum dan
dirumuskan dalam formulasi E=hv. Pada teori gelombang
elektromagnetik v adalah frekuensi atau
banyaknya gelombang perdetik diperlihatkan dalam formula v=c/l Bila kedua
teori ini digabung maka :
E = hv
v = c/l l l l sehingga
E = h.c/l l l l
dimana :
E = energi foton (kuantum)
h = tetapan (konstanta) Planck (662 x 10 –27
erg/detik)
c = kecepatan cahaya (3 x 10 cm/detik)
l = panjang gelombang
v = frekwensi (banyaknya gelombang per detik) . Radiasi cahaya yang terserap
oleh pigmen klorofil untuk fotosintesis hanya
antara 380 nm s/d 760 mm. Di atas 760 mm, foton tidak mempunyai cukup
energi untuk melansungkan fotosintesis dan
dibawah 380 nm memiliki energi terlalu banyak yang dapat mengakibatkan
terjadinya ionisasi dan kerusakan pigmen. Daerah aktif fotosintesis
disebut daerah photosynthetical
active radiation (PAR) yang umumnya terletak antara panjang gelombang
400 mm s/d 700 mm atau pada sinar ungu
sampai merah. Absorbsi cahaya
oleh pigmen klorofil daun dapat dijelaskan dalam
Hukum Start Einstein yang menyatakan bahwa setiap molekul hanya dapat
menyerap satu foton. Setiap satu foton akan
mengakibatkan tereksitasnya satu elektron. Elektron dalam satu atom terletak
dalam orbit-orbit yang tetap.
Jika pigmen klorofil menyerap energi foton, maka molekul klorofil akan berada dalam
keadaan tereksitasi dan energi eksitasi inilah
yang digunakan dalam fotosintesis Klorofil dan pigmen lainnya
tereksitasi hanya dalam waktu yang relatif
singkat yaitu selama 10-9detik atau lebih singkat dari itu. Energi eksitasi
yang diinduksi akan hilang
karena dibebaskan melalui tiga cara :
1. Energi hilang dalam bentuk panas pada waktu elektron
kembali ke orbit dasarnya
2. Energi hilang dalam bentuk panas dan cahaya flouresen
3. Energi hilang karena digunakan untuk suatu reaksi kimia
seperti fotosintesis.
Bila klorofil menyerap energi
cahaya, menyebabkan satu elektron dari
klorofil tereksitasi. Elektron yang tereksitasi ini diteruskan ke senyawa-senyawa
kimia khusus yang terdapat di dekat klorofil di
dalam kloroplas yang mempunyai kemampuan menerima elektron pada tingkat energi
yang baru. Senyawa - senyawa ini dinamakan akseptor elektron atau pembawa elektron. Jadi pada peristiwa ini
terjadi aliran elektron dari suatu senyawa ke senyawa lain dalam
suatu urutan reaksi oksidasireduksi, dimana masing-masing reaksi dikatalisis
oleh enzim tertentu. Dalam
proses aliran elektron tersebut, energi dalam elektron tereksitasi dibebaskan
sedikit demi sedikit. Energi yang dibebaskan ini digunakan untuk
membentuk suatu senyawa kimia berenergi
tinggi yang disebut Adenosin Tri Fosfat (ATP).
Pada peristiwa fotosintesis terdapat dua cara pemindahan elektron, yaitu siklik
dan non siklik. Pada pemindahan secara siklik,
elektron eksitasi yang berasal dari klorofil setelah dipindahkan dari satu akseptor ke
akseptor lainnya, elektron kembali ke
klorofil. Pada pemindahan elektron nonsiklik, elektron yang meninggalkan
klorofil tidak kembali ke klorofil. Klorofil 11 yang kehilangan satu elektron
akan menerima elektron dari hasil fotolisis
air. Uraian selengkapnya akan dibahas pada fase terang fotosintesis.
Kloroplas berasal dari kloroplas
yang sudah ada selama daur hidup tumbuhan
tinggi dan diteruskan ke sel-sel turunannya selama
pembelahan sel. Tipe pembelahan sama dengan mitokondria, penyempitan
terjadi didaerah bagian tengah koroplas,
dan kedua hasil pembelahan dipisahkan pada daerah tersebut. Umumnya
pembelahan kloroplas tidak serempak di dalam
jaringan atau sel-sel tumbuhan. Sejumlah faktor berpengaruh terhadap
pembelahan kloroplas seperti cahaya, suhu,
nutrisi, hormon, dan stress air.
Seperti halnya mitokondria,
kloroplas memiliki molekul DNA (ct DNA) yang
berbentuk melingkar (sirkuler). DNA biasanya terdapat dalam kopi
berganda sebanyak 20 hingga 60 ctDNA per
kloroplas. Berat ct DNA berkisar 85-140 x 106
dalton dengan panjang berkisar 45 um – 60 um, hal ini bergantung pada speciesnya. ct
DNA mengkode lebih dari 150 protein dengan berat
molekul berkisar 50.000 dalton, kurang lebih sama dengan jumlah protein
yang terdapat di dalam kloroplas. Namun
demikian tidak semua protein dikode oleh Ct DNA. Replikasi dan differensiasi
dikontrol sebagian oleh genom inti dan sebagian
lagi oleh ctDNA. Protein stroma dan
protein membran tilakoid yang dikode oleh DNA inti dan dibentuk oleh
ribosom sitoplasmik, yaitu sub unit kecil enzim
ribulosa difosfat karboksilase, enzim-enzim lain daur Calvin, asam nukleat
polimerase, dan aminoasil tRNA sintetase,
merupakan protein yang dimasukkan ke dalam kloroplas.
Membran tilakoid terdiri atas
lipida kurang lebih 50%. Kurang lebih 10%
lipida terdiri atas fosfolipida. Lipida yang khas bagi klorofil yaitu
galaktolipida dan sulfolipida yang terdiri atas masing-masing 45 % dan 4%
dari total lipida. Selain itu juga terdapat
molekul-molekul lipida seperti klorofil kira-kira 20% dari total membran tilakoid,
karotenoid, dan plastokuinon
Klorofil merupakan pigmen fotosintesis yang sangat penting. Di alam dikenal ada
sembilan jenis klorofil, yaitu klorofil a, b, c, d, e, bakterioklorofil
a, bakterioklorofil b, klorobium klorofil 650 dan
klorobium. Klorofil pada tanaman pembuluh dan briophyta terdapat di dalam
kloroplas, yaitu di dalam membran tilakoid.
Klorofil tidak efektif mengabsorbsi cahaya hijau sehingga lebih banyak direfleksikan (dipantulkan)
dan ditransmisikan (diteruskan). Hal
inilah yang menyebabkan mengapa klorofil tampak berwarna hijau. Bagian
dari spectrum cahaya yang diserap oleh
klorofil selama proses fotosintesa dapat ditentukan dengan menempatkan suatu larutan
klorofil di dalam alkohol diantara suatu
sumber cahaya dan suatu prisma kaca.
Spektrum yang terbentuk berbeda dengan spektrum cahaya putih yang tidak melewati
klorofil. Spektrum cahaya yang melewati larutan
klorofil, panjang gelombang yang diserap terlihat sebagai pita-pita gelap
dan dinamakan pita-pita serapan. Posisi pita-pita
gelap dalam spektrum klorofil menunjukkan panjang gelombng mana yang
diserap. Terlihat bahwa banyak dari cahaya merah,
bitu dan violet yang diserap yang merupakan panjang gelombang yang
banyak digunakan dalam fotosintesis.
Sebagian merah dan sebagian besar kuning, jingga dan hijau tidak diserap
sama sekali (Arbaya dan Sasmitamihardja,
1982), Proses fotosintesis berlangsung
dalam plastida dari organisme sel yang
disebut kloroplas. Di dalam kloroplas mengandung pigmen klorofil yang
berwarna hijau sebagai pigmen utama
penyerap cahaya dan karotenoid sebagai pigmen pelengkap. Tumbuhan tinggi
mengandung dua macam klorofil yaitu
klorofil a dan b, sedang karotenoid yang paling banyak terdapat dalam tumbuhan
adalah b karoten dan lutein. Karotenoid adalah
senyawa hidrokarbon yang terdistribusi dalam
tanaman dengan kisaran warna kuning, dijumpai di dalam kloroplas dan
kromatofor lain. Seperti halnya dengan klorofil,
beberapa karotenoid mengirim energi eksitasinya ke pusat reaksi.
Pigmen karotenoid (b karoten dan lutein) hanya
mengabsorbsi cahaya biru dan ungu, sedang cahaya hijau, kuning, orange dan
merah dipantulkan. Karotenoid bagi
tanaman juga berperan untuk melindungi 7 klorofil dari kerusakan akibat
oksidasi pada intensitas cahaya tinggi. Apabila
kita bandingkan pengaruh berbagai panjang gelombang terhadap laju
fotosintesis, maka akan diperoleh spektrum Action pada kisaran
panjang gelombang daerah cahaya tampak
(visible light).
Karotenoid alami dapat berupa likopene berwarna merah pada tomat dan ß-karoten,
berwarna kuning. Karotenoid pada tanaman berfungsi
untuk melindungi klorofil dari fotooksidasi dan dapat menyerap serta
memindahkan energi cahaya ke klorofil a.
Kloroplas merupakan organel tempat berlangsungnya fotosisintesis Bentuk koloroplas
pada berbagai jenis tuimbuhan cukup bervariasi,
antara lain berbentuk mang-kuk, bentuk pita, hingga bentuk menyerupai lensa.
Pada tumbuhan rendah seperti
chlamydomonas, kloroplas berbentuk mangkuk, dan pada spyrogyra bentuknya
menyerupai bangun pita. Pada tumbuhan tinggi,
kloroplas berbentuk menyerupai lensa.
Ukuran kloroplas pada tumbuhan tinggi panjangnya berkisar 5-10
um, dan jumlahnya berkisar 50 – 200/sel. Bentuk dan struktur kloroplas ditunjukkan
pada gambar 12.3 dan 12.4. Kloroplas merupakan
organel berbatas membran ganda. Setiap membran
memiliki ketebalan berkisar 700 - 800
Membran kloroplas terdiri atas membran luar dan membran dalam yang dipisahkan oleh ruang
antar membran dengan lebar kurang lebih 10 nm.
Ruang antar membran mengandung molekul-molekul
nutrien sitosol.
Membran luar permiabel terhadap sejumlah senyawa dengan berat molekul rendah
seperti nukleotida, fosfat organik, derivat-derivat fosfat, asam karboksilat dan sukrosa.
Membran dalam bekerja
sebagai pembatas fungsional antara sitosol dan stroma. Membran dalam tidak
permiabel terhadap sukrosa, sorbitol, dan
berbagai anion, misalnya di dan trikarboksilat, fosfat, dan senyawa-senyawa
seperti nukleotida dan gula fosfat, namun demikian bersifat permiabel
terhadap CO2, asam-asam monokarboksilat
tertentu seperti asam asetat, asam gliserat, dan asam glikolat. Pada membran
dalam terdapat sejumlah protein pembawa
tertentu untuk mengangkut fosfat, fosfogliserat, dihidroksi aseton
fosfat, dikarboksilat, dan ATP. Membran bagian
dalam terdiri atas kantung-kantung membran berbentuk pipih yang
dinamakan tilakoid. Tilakoid terdapat di dalam
stroma. Tilakoid terdiri dari dua bentuk, yaitu bentuk cakram pipih dan bentuk
lamella. Tumpukan beberapa tilakoid yang
berbentuk cakram pipih disebut grana., dan masing-masing tilakoidnya disebut
tilakoid grana (grana lamella). Tilakoid
yang memanjang ke arah stroma dinamakan tilakoid stroma (grana lamella)
yang menghubungkan tilakoid grana. Setiap
tilakoid memiliki ruang dalam yang dinamakan lokulus.
Pada membran tilakoid terdapat enzim-enzim untuk melaksnakan reaksi fotosintesis
yang bergantung cahaya. Klorofil, pembawa
elektron, dan faktor-faktor yang menggabungkan transpor elektron dengan
fosforilasi terdapat pada membran tilakoid.
Bagian dalam kloroplas terdapat stroma yang mengandung enzim-enzim yang
penting bagi assimilasi CO2 dan mengubahnya
menjadi karbohidrat. Selain itu, pada stroma juga dijumpai butir pati,
plastoglobulin (tempat menyimpan lipida, terutama
plastokuinon dan tokoforilkuinon), ribosom, dan DNA.